嘉善不锈钢电泳厂家
按支持物的物理性状不同,区带电泳可分为:(1)滤纸为支持物的纸电泳;(2)粉末电泳:如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳;(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳;(4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳。按支持物的装置形式不同,区带电泳可分为:(1)平板式电泳:支持物水平放置,是常用的电泳方式;(2)垂直板电泳:聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直板式电泳。(3)柱状(管状)电泳:聚丙烯酰胺凝胶可灌入适当的电泳管中做成管状电泳.按pH的连续性不同,区带电泳可分为:(1)连续pH电泳:如纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳;(2)非连续pH电泳:如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳。区带电泳按支持物的物理性状不同。嘉善不锈钢电泳厂家
区带电泳是在一定的支持物上,于均一的载体电解质中,将样品加在中部位置,在电场作用下,样品中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速度移动,分离成一个个彼此隔开的区带。区带电泳按支持物的物理性状不同,又可分为纸和其他纤维膜电泳、粉末电泳、凝胶电泳与丝线电泳。等电聚焦电泳(cIEF)是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽中,当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷,向负极移动;若其处在高于其本身等电点的环境中,则带负电向正极移动。当泳动到其自身特有的等电点时,其净电荷为零,泳动速度下降到零,具有不同等电点的物质然后聚焦在各自等电点位置,形成一个个清晰的区带,分辨率极高。嘉善不锈钢电泳厂家聚丙烯酰胺凝胶电泳可用做蛋白质纯度的鉴定。
电泳的应用:1.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用做蛋白质纯度的鉴定.聚丙烯酰胺凝胶电泳同时具有电荷效应和分子筛效应,可以将分子大小相同而带不同数量电荷的物质分离开,并且还可以将带相同数量电荷而分子大小不同的物质分离开。其分辨率远远高于一般层析方法和电泳方法,可以检出10-9~10-12g的样品,且重复性好,没有电渗作用。2.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可测定蛋白质分子量.其原理是带大量电荷的SDS结合到蛋白质分子上克服了蛋白质分子原有电荷的影响而得到恒定的荷/质比。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白质分子量已经比较成功,此法测定时间短,分辨率高,所需样品量极少(1~100μg),但只适用于球形或基本上呈球形的蛋白质,某些蛋白质不易与SDS结合如木瓜蛋白酶,核糖核酸酶等,此时测定结果就不准确。
电泳已日益普遍地应用于分析化学、生物化学、临床化学、毒剂学、药理学、免疫学、微生物学、食品化学等各个领域。在直流电场中,带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳(electropho-resis)。1807年,由俄国莫斯科大学的斐迪南·弗雷德里克·罗伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)首先发现了电泳现象,但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分离蛋白质的界面电泳(boundary electrophoresis)之后,电泳技术才开始应用。上世纪60-70年代,当滤纸、聚丙烯酰胺凝胶等介质相继引入电泳以来,电泳技术得以迅速发展。丰富多彩的电泳形式使其应用十分普遍。电泳技术除了用于小分子物质的分离分析外,主要用于蛋白质、核酸、酶,甚至与细胞的研究。由于某些电泳法设备简单,操作方便,具有高分辨率及选择性特点,已成为医学检验中常用的技术。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。
电泳中开始的撑持介质是滤纸和醋酸纤维素膜,当前这些介质在实验室现已应用得较少。在很长一段时刻里,小分子物质如氨基酸、多肽、糖等通常用滤纸或纤维素、硅胶薄层平板为介质的电泳进行别离、剖析,但当前则通常运用更活络的技能如HPLC等来进行剖析。这些介质适合于别离小分子物质,操作简略、便利。但关于杂乱的生物大分子则别离作用较差。凝胶作为撑持介质的引进促进了电泳技能的开展,使电泳技能成为剖析蛋白质、核酸等生物大分子的重要手法之一。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。嘉善不锈钢电泳厂家
电泳中蛋白带模糊不清和分辨不佳是由于多种原因引起的。嘉善不锈钢电泳厂家
电泳中的电场强度是指每厘米的电位降(电位差或电位梯度).电场强度对电泳速度起着正比作用,电场强度越高,带电颗粒移动速度越快。根据实验的需要,电泳可分为两种:一种是高压电泳,所用电压在500~1000V或更高.由于电压高,电泳时间短(有的样品需数分钟),适用于低分子化合物的分离,如氨基酸,无机离子,包括部分聚焦电泳分离及序列电泳的分离等。因电压高,产热量大,必须装有冷却装置,否则热量可引起蛋白质等物质的变性而不能分离,还因发热引起缓冲液中水分蒸发过多,使支持物(滤纸,薄膜或凝胶等)上离子强度增加,以及引起虹吸现象(电泳槽内液被吸到支持物上)等,都会影响物质的分离.另一种为常压电泳,产热量小,室温在10~25℃分离蛋白质标本是不被破坏的,无需冷却装置,一般分离时间长。嘉善不锈钢电泳厂家
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